换一批毕赤酵母表达全长单克隆抗体的设计及优化
Expression design and optimization of full-length monoclonal antibodies in Pichia pastoris
摘要目的 利用毕赤酵母底盘宿主表达单克隆抗体,并探索多种表达优化策略以提高抗体产量.方法 以毕赤酵母为底盘细胞,用甲醇诱导型系统PAOX1和乙醇诱导型系统E1分别尝试多种单克隆抗体蛋白的重组表达,并通过分子伴侣过表达和培养基组分优化进一步提升产量后,经3 L反应器高密度发酵培养验证重组菌株生产能力.结果 乙醇诱导表达的依普奈珠单克隆抗体产量可达12.4 mg/L.分子伴侣Ppi1和Biph的过表达分别使依普奈珠单克隆抗体产量提升约22.5％和23.0％;添加1.0g/L硫酸铵、0.05 mol/L磷酸钾缓冲对和80 mmol/L苏氨酸也分别使依普奈珠单克隆抗体产量提升约57.1％、25.8％和58.1％.在3 L生物反应器水平,Biph过表达菌株的完整抗体产量相较于摇瓶水平提升约5.9倍,最高产量达74.1mg/L.结论 依普奈珠单克隆抗体在毕赤酵母底盘宿主中可成功表达,并且通过多种表达调控策略能够有效提升抗体产量,为毕赤酵母表达单克隆抗体提供了新的思路和方向.
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2025-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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