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基于铁基金属有机框架材料的构建及其佐剂效应

Construction of an iron-based metal organic framework material and investigation of adjuvant effects

摘要目的 构建一种基于铁基金属有机框架(metal organic framework,MOF)材料,并探讨其作为佐剂在小鼠体内对免疫反应的影响.方法 利用水热反应合成法合成铁基MOF材料,采用透射电子显微镜(transmission electron micro-scope,TEM)、扫描电子显微镜(scanning electron microscope,SEM)、动态光散射粒度分析仪(dynamic light scattering particle analyzer,DLS)、X射线光电子能谱仪(X-ray photoelectron spectrometer,XPS)、比表面积分析测试仪(Brunauer Emmett Teller,BET)对材料的形貌和成分进行表征.以卵清蛋白(ovalbumin,OVA)为免疫原,将20只雌性BALB/c小鼠随机分为铁基 MOF+OVA组(60 μg铁基MOF+20 μg OVA)、铝佐剂(Alu)+OVA 组(50 μg Alu+20 μg OVA)、OVA组(20 μg OVA)、空白组(0.9%生理盐水),分别于0、14、28d经大腿外侧肌内注射,100μL/只.初次免疫后7、21、42 d经小鼠尾静脉采血,分离血清,ELISA法检测特异性IgG抗体水平;初次免疫后42 d,ELISA法检测小鼠血清中特异性IgG亚型抗体水平,ELISPOT法检测小鼠脾细胞分泌IFNγ的情况,流式细胞术检测小鼠脾CD4+和CD8+T细胞分泌IFNγ、IL-2和IL-4的水平.分别测量初次免疫后0、7、14、21、28、35、42 d的小鼠体质量,并观察各组小鼠的行为.结果 合成的铁基MOF材料均呈均一类圆形,水合粒径约129.4 nm;含有C、N、S和Fe元素,且Fe元素含量较多;比表面积为16.7 m2/g,孔径为7.73 nm.初次免疫后42 d,与Alu+OVA组比较,铁基MOF+OVA组IgG抗体水平差异无统计学意义(F=1.00,P>0.05),IgG2a和IgG2b抗体水平显著升高(F分别为16.90和16.57,P均<0.05);脾细胞分泌IFNγ水平显著升高(F=19.47,P均<0.05);CD4+T细胞分泌IFNγ的水平显著升高(F=14.94,P<0.01),但CD8+T细胞分泌IFNγ水平差异无统计学意义(F=1.00,P>0.05),CD8+T细胞分泌IL-2和IL-4水平均显著升高(F分别为100.00和945.80,P均<0.001).免疫过程中小鼠未出现脱毛或拒食等异常行为,各组小鼠体质量变化较小.结论 制备的铁基MOF材料易于合成,结构稳定,具备纳米级别的尺径,可诱导小鼠产生体液和细胞免疫应答,有望成为一种新型疫苗佐剂.

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中国生物制品学杂志

中国生物制品学杂志

2025年38卷9期

1035-1042页

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