免疫电泳法中电泳缓冲液的筛选及验证
Screening and validation of novel electrophoretic buffers for immunoelectrophoresis
摘要目的 筛选免疫电泳法中可替代巴比妥缓冲液(barbiturate solution,BBTS)的缓冲液,并进行验证,以期获得更安全、环保,且与BBTS电泳效果相当的缓冲液.方法 配制三羟基氨基甲烷-乙二胺四乙酸二钠-醋酸(trihydroxy amino-methane-acetic acid-disodium ethylenediamine tetraacetate,TAE)、甘氨酸-氢氧化钠缓冲液(glycine-sodium hydroxide,Gly-NaOH)、三羟基氨基甲烷盐酸缓冲液(trihydroxy aminomethane-hydrochloric acid,Tris-HCl)、硼酸盐缓冲液(borate buffer solution,BBS)、磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution,PBS)共5种待考察的缓冲液,通过免疫电泳试验,以人血白蛋白和人免疫球蛋白为供试品,以沉淀弧清晰度和迁移距离为指标进行初筛与确认.并验证方法的专属性、耐用性、稳定性及适用性.结果 5种缓冲液中,TAE和PBS的电泳效果较好,人血白蛋白和人免疫球蛋白迁移距离适中,可形成清晰的沉淀弧,与BBTS电泳效果相当,且具有良好的专属性、耐用性、稳定性及适用性.结论 制备PBS所需的试剂更易获得、成本更低且使用更安全,最终选择PBS缓冲液作为免疫电泳法中BBTS的替代缓冲液.
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