凝血酶原复合物制备过程吸附条件的研究

Studies of adsorption conditions in prothrombin complex concehtrates production

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摘要目的探讨凝血酶原复合物制备过程凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、X的吸附条件,提高活性收率.方法选择DEAE-SephadexA-50凝胶平衡体系中柠檬酸钠、氯化钠、pH 3种可变因素,每因素取3水平,根据L9(33)正交表设计试验,配制平衡液,分别对DEAE-SephadexA-50凝胶进行平衡处理后,按1.67g/L加入等量健康人混合去冷沉淀血浆,4℃搅拌,吸附凝血因子；吸附后凝胶洗涤、洗脱,检测洗脱液中凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、X活性并进行活性回收率正交试验直观分析,获得较优吸附条件并进行验证.此外,分析吸附平衡体系电导率与4种因子活性收率间关系.结果柠檬酸钠、氯化钠、pH对凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、X吸附影响不同；在所考察范围内,pH对4种凝血因子吸附影响效应趋势一致,pH越低,吸附效果越佳；柠檬酸钠及氯化钠浓度对4种凝血因子吸附影响效应趋势不一致,柠檬酸钠浓度越高,凝血因子Ⅱ、Ⅶ、X吸附越佳,而凝血因子Ⅸ在(0.012～0.02)mol/L水平较佳；氯化钠浓度越低,凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ吸附越佳,而凝血因子X在(0.1 ～0.14)mol/L水平较佳；平衡体系电导率与4种因子活性收率间不存在线性关系.结论吸附条件中pH及柠檬酸钠浓度对凝血因子Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、X吸附效果影响较大.柠檬酸钠(0.02～0.028)mol/L,氯化钠(0.02～0.06)mol/L,pH6.6～6.9条件,4种凝血因子吸附效果相对较佳.电导率对4种因子吸附效果影响不明显.