基于RhD蛋白Aptamer筛选技术的随机ssDNA次级文库制备条件的优化
Optimization of aptamer screening technology for RhD protein to generate subprime ss-DNA library
摘要目的 优化筛选RhD蛋白DNA-aptamer的ssDNA次级文库制备条件.方法 对影响dsDNA扩增的主要参数(退火温度、循环数、模板用量、引物用量等)进行优化,在确定dsDNA扩增条件已优化的基础上,进而优化上、下游引物用量比例及扩增循环数,确定不对称PCR制备ssDNA的最佳条件.结果 不对称PCR扩增的最佳条件为:上游引物终浓度为1 pmol/μL,上、下游引物浓度比例为20∶1,退火温度为59℃,循环数为30-35.结论 制备条件优化后,经过不对称PCR扩增可获得浓度高、纯度好的ssDNA次级文库.
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