IL-6、PHA联合磁珠分选对CIK增殖能力和杀伤肾癌786-O细胞功能的影响

The effect of IL-6、PHA and IMB sorting on proliferation and function of CIK cells

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摘要目的通过体外实验研究白介素-6(IL-6)、植物血凝素(PHA)联合免疫磁珠(IMB)分选对CIK增殖能力和杀伤肾癌786-O细胞功能的影响,为肾脏肿瘤的免疫治疗提供理论依据.方法分离肿瘤患者外周血单个核细胞(PBMC),经Mini MACS免疫磁珠去除CD4+ CD25+ Treg细胞后分为4组:对照组以CD3 McAb、IL-2和IFN-γ诱导培养;PHA-CIK组、IL-6-CIK分别在对照组的基础上加用PHA、IL-6;PHA-IL-6-CIK组在对照组的基础上加用PHA和IL-6.CCK-8法检测各组CIK细胞的增殖率;流式细胞术(FCM)检测各组CIK细胞CD3+ CD8+、CD3+ CD56+、Treg表型比例;乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测各组CIK细胞对肾癌786-O细胞的杀伤功能.结果磁珠分选后,PBMC中Treg细胞的比例降低至(1.21±0.53)％;PHA-IL-6-CIK组细胞的增殖率达(28.33±3.05)％;PHA-IL-6-CIK组细胞的CD3+ CD8+、CD3+ CD56+比例分别升高至(63.13±2.70)％和(35.32±2.96)％,Treg细胞比例降低至(1.11±0.07)％;在效靶比为30:1时,PHA-IL-6-CIK组细胞对肾癌786-O细胞的杀伤率可达(42.76±3.40)％.结论 IL-6、PHA联合磁珠分选可显著增强CIK的增殖和杀伤肾癌786-O细胞能力.