结合于红细胞表面单链短核苷酸提取方法学建立研究
Study on the method to extract short single stranded nucleotidebinding on the surface of the red blood cells
摘要目的 建立用于红细胞消减SELEX筛选的单链短核苷酸的提取方法.方法 使用高灵敏度的硅烷磁珠法提取结合于红细胞表面的单链短核苷酸,并采用实时荧光定量PCR法对其进行定量检测.同时以常用的酚氯仿提取法为对照,评价硅烷磁珠提取法的优劣.结果 硅烷磁珠法提取结合于红细胞表面的单链短核苷酸的拷贝数为(4.79±0.13)×10m/μL,而常用的酚氯仿法为(3.61±0.14)×1010/μL.两者相比统计学差异显著(t=17.825,P<0.05).结论 与酚氯仿提取法相比,硅烷磁珠法提取ssDNA的灵敏度更高,可获得更多的结合于红细胞表面的单链短核苷酸.
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