利用实时能量代谢检测技术研究贮存单采血小板的线粒体呼吸功能
Study on mitochondrial respiratory function in stored apheresis platelets using real-time energy metabolism detec-tion technology
摘要目的 探索利用实时能量代谢检测技术检测单采血小板(AP)中线粒体呼吸功能(MRF)的最佳条件参数,并研究AP在贮存过程中MRF的变化.方法 收集AP标本,利用Seahorse XF检测其中MRF,通过调整AP的上样浓度、洗涤条件、线粒体呼吸调节药物浓度等多项参数,最后分别研究贮存 1d和5d的AP中MRF.结果 AP上样浓度为 5×107/100 μL时,基础呼吸值 316±65 为最优;洗涤组的基础呼吸值 329±120 比未洗涤组的 57±7 更优(P<0.05);FCCP浓度以 2 μmol/L为最优.贮存 1dAP的基础呼吸值为 683±161,而贮存 5dAP的基础呼吸值为140±23(P<0.05);贮存 1dAP的最大呼吸值为 1 044±82,而贮存 5dAP最大呼吸值<200(P<0.05).2 组的MRF动力曲线有明显差异.结论 实时能量代谢检测技术可以实现对AP中MRF的检测.AP在贮存过程中MRF明显受损,提示这可能是血小板贮存损伤的重要新机制.
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