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流式细胞术检测HLA-C分子表达水平的影响因素探讨

Exploration on factors influencing HLA-C molecular expression level by flow cytometry

摘要目的 探讨流式细胞术检测HLA-C分子表达水平的影响因素.方法 收集 2024 年 3-5 月外周造血干细胞志愿捐献者CD34 细胞计数检测后剩余的单采造血干细胞悬液标本共 12 例,分别探讨读取有核细胞不同数量(50 万、5 万、0.5 万个)、加入红细胞裂解液及抗体的先后顺序不同、距离失效期时长不同的HLA-C抗体,对HLA-C表达水平检测结果的影响,并采用Student t检验分析组间差异显著性.结果 分别读取 50 万、5 万、0.5 万个有核细胞,3 组数据组间HLA-C阳性细胞占比、平均荧光强度差异均无显著性(P>0.05);加入红细胞裂解液及抗体的先后顺序不同,对于HLA-C阳性细胞占比差异无显著性(P>0.05);但"先裂解红细胞再加抗体"的HLA-C MFI值显著低于"先加抗体再裂解红细胞"的MFI值(P<0.05);使用距失效期仍有 24 个月的HLA-C抗体所检出的阳性细胞占比及MFI值,显著高于距失效期仅剩有 5 个月的HLA-C抗体(P<0.05).结论 本文探讨了流式细胞术检测HLA-C分子表达水平的影响因素,研究结果对规范HLA-C表达水平的实验操作、提高检测结果的准确性和可比性具有良好的参考和应用价值.

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