换一批
换一批一步法PCR检测大鼠肺支原体核酸的研究
Studies on Detecting Nuclectide of Mycoplasma Pulmonis One-Step Methods by Polymerase Chain Reaction
摘要一步法体外扩增结合Southern杂交检测M53鼠肺支原体标准株,设计一对特异寡核苷酸引物及探针,合成、纯化、建立了特异、敏感、快速的检测手段.扩增产物经琼脂糖凝胶电泳鉴定,结果显示鼠肺支原体M53株基因组DNA 710bp特异谱带.对50只SD大鼠进行检测,结果PCR方法检出率高于分离培养法,扩增产物行Southern blot杂交验证,采用碱性磷酸酶标记寡核苷酸探针,可与膜上特异靶DNA序列杂交,而阴性对照无杂交信号.特异性实验检出10pg的DNA.充分说明一步法PCR,具有高度、特异、灵敏、快速等优势,适应与大、小鼠监测中应用.
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