换一批
换一批iRhom2及其突变基因重组慢病毒的包装和稳定表达细胞系的建立
Packaging of the recombinant lentivirus of iRhom2 and its mutant and establishment of a stable iRhom2-expressing cell line
摘要目的：通过重组慢病毒感染，建立iRhom2及其突变基因的Vero细胞稳定细胞表达系，用于iRhom2的功能研究。方法将iRhom2及其突变基因克隆到慢病毒载体Lenti－OE－Flag，构建重组慢病毒载体Lenti－OE－iRhom2和Lenti－OE－iRhom2mut，将重组质粒瞬时转染HEK－293T包装细胞，获得重组慢病毒。将重组病毒感染Vero细胞，利用puromycin进行加压筛选，获得二者的重组表达细胞系。结果构建了iRhom2及其突变基因的逆转录病毒载体，并获得了重组逆转录病毒，并利用该病毒获得了二者的稳定表达细胞系。 Western－blot实验证实，二者能够在Vero细胞内稳定表达。结论利用重组逆转录病毒感染，成功获得了iRhom2及其突变系的Vero细胞稳定表达株，为进一步研究iRhom2的生物学功能及其机制奠定了良好的基础。
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