摘要目的 本研究拟基于新型非酒精性脂肪性肝炎(metabolic dysfunction-associated steatohepatitis,MASH)-肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)小鼠模型(HRAS-HCC),研究伴随非酒精性脂肪肝炎相关的肝癌发生的肾损伤、功能失调、组织学及分子学特征,以探索MASH-HCC诱发肾损伤的潜在机制,旨在为临床研究疾病发生机制及探索诊疗方法提供重要模型工具.方法 实验采用本课题组自主构建的HRAS-HCC小鼠,以同窝隐性小鼠和野生型C57BL/6小鼠为对照组.5周龄时通过注射他莫西芬诱导小鼠肝组织中HRAS基因表达,进而引发MASH-HCC的发生与进展.在MASH-HCC进展过程中(1～4周),定期监测小鼠的体质量、精神状态等一般特征,并于选择时间点采集血液样本并检测相关指标;通过苏木素-伊红(HE)和Masson染色分析小鼠肾组织的病变特征.结果 与HRASNON-TAM组相比,HRAS-HCC小鼠在一个月内从MASH阶段,经肝纤维化进展到HCC,表现出黄疸、呼吸急促、弓背、便血、肝肿大和脾肿大等临床症状.4周时,HRAS-HCC 小鼠血清中碱性磷酸酶(ALP)降低(P＜0.05),血清尿酸氮(UREA)、尿酸(UA)和肌酐(CREA)升高(P＜0.05).HE结果显示,HRAS-HCC小鼠肾组织在不同时期存在程度不一的肾小管嗜碱性变、透明性肾小球、肾小管上皮细胞透明滴样变等多种病变.同时,Masson染色观察到HRAS-HCC小鼠肾组织还存在纤维化病变,且肾纤维化(2～3周)与肝纤维化/肝硬化(2～3周)的发生时间及严重程度存在相关性.进一步检测肾损伤相关分子表达发现,3周时细胞角蛋白18(KRT18)、SMAD3、纤维连接蛋白1(FN1)、转化生长因子β(TGFβ)在mRNA水平表达升高(P＜0.05).同时,蛋白质互作网络(PPI)分析结果显示人源HRAS和FN1、SMAD3间存在蛋白互作关系.结论 本研究结果表明,MASH-HCC引起的肾损伤与肝纤维化程度呈正相关关系,初步展示了MASH-HCC引起的肾损伤病理特征和分子特征,提示HRAS-SMAD3-FN1轴可能存在重要的作用.本研究呈现了特有的MASH-HCC伴随肾损伤动物模型,该模型较真实的重现了临床上肾损伤的疾病特征,为制定该疾病的临床治疗策略奠定了基础.