换一批
换一批摘要目的 构建致病性结核分枝杆菌早期分泌性抗原靶(Early secretary antigenic target, ESAT-6)基因的pET原核表达载体,诱导表达并初步鉴定该蛋白.方法 设计特异性引物,用PCR方法从结核分枝杆菌标准株H37Rv基因组中扩增ESAT-6基因,产物通过双酶切克隆入pET-32a(+)质粒,经PCR、酶切、测序等方法鉴定后,转入大肠杆菌BL21菌体中IPTG诱导表达,并经镍柱纯化、Western-blotting鉴定.结果 所获得ESAT-6基因序列与GenBank公布的完全一致;表达融合蛋白相对分子质量约2.5×104,并能与特异性单抗结合,具有一定免疫学活性.结论成功表达纯化并鉴定构建了ESAT-6融合蛋白.
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分类号
R378
栏目名称
研究报告
DOI
10.3969/j.issn.1671-7856.2008.07.005
发布时间
2008-09-01
基金项目
广东省科技厅科技计划
广东省自然科学基金
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