换一批重组胸腺素α1 pMAL-C2x-Tα1/TB1工程菌的构建与表达
Construction and Expression of Recombinant Tα1 pMAL-C2x-Tα1/TB1 Engineering Strain
摘要目的 构建表达重组胸腺素α1(Tα1)的pMAL- C2x - Tα1/TBI工程菌.方法 将人工合成的Tα1序列进行PCR扩增,将扩增的片段和pMAL- C2x质粒载体分别经BamHI和EcoR I双酶切后,用T4 DNA快速连接酶连接构建pMAL- C2x - Tα1融合表达质粒,再经测序正确后,将重组体转化至大肠埃希菌TB1菌中,pMAL- C2x -Tα1/TB1菌在LB液体培养基中培养,经IPTG诱导表达麦芽糖结合蛋白与Tα1的融合蛋白(MBP- Tα1),采用Westernblot对MBP- Tα1进行鉴定.结果 pMAL-C2x-Tα1/TB1工程菌能有效表达MBP- Tα1,融合蛋白占菌体蛋白的33.6％,分子量约为45×103.结论 工程菌的成功构建和表达为重组Tα1的纯化、生物学活性等研究奠定了基础.
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分类号
S859R332（人体生理学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1671-7856.2012.007.004
发布时间
2012-12-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
重庆市科技攻关计划（30111-14281）
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