换一批eNOS基因重组腺病毒载体在大鼠骨髓来源内皮祖细胞中的表达分析
Construction of recombinant adenovirus containing eNOS gene and analysis of its expression and location in endothelial progenitor cells from rat bone marrow
摘要目的 探讨eNOS基因重组腺病毒载体在大鼠骨髓来源内皮祖细胞(EPCs)中的表达与作用.方法将eNOS基因插入载体PSUCMV中构建重组质粒PSUCMVeNOS,经酶切、插入、转染后包装扩增成腺病毒颗粒;大鼠胫骨获取骨髓,制备EPCs,鉴定正确后传代纯化,将三代细胞随机分为PBS对照组(C组)、Lac基因转染组(L组)和eNOS基因转染组(N组).分别于干预后第1 天、第3天、第7天观察各组细胞形态的变化,检测培养液中NO含量和各组细胞eNOS表达的变化.结果 AdCMVeNOS病毒DNA成功包装成完整的病毒颗粒,测其滴度为1.58 × 1010 PFU/mL;将其转染鉴定正确的EPCs,结果于体外转染后 1 d内,即可检测到eNOS转基因产物的表达增加;N组同一时点eNOS含量明显高于L组、C组,组间比较差异显著;组内比较,N7、N3与N1组比较差异显著.随时间延长NO生成量递增,第3天与第7天结果差异有显著性.结论 eNOS基因可在大鼠EPCs中高效表达,并可促使培养液中NO含量明显增高.
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分类号
R33（人体生理学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1671-7856.2013.10.006
发布时间
2013-12-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
辽宁省科技攻关基金课题（(2008225025,2012225006)）
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