换一批摘要目的：研究胃癌相关miR-148a与胃泌素受体CCKBR的调控关系，并分析其调控结合位点。方法生物信息学预测人CCKBR 3’ UTR上miR-148a 的结合位点；利用 PCR扩增 miR-148a 前体构建真核表达载体；Northern Blot检测miR-148a真核表达载体的表达；构建CCKBR 3’UTR野生型和突变型荧光素酶报告载体，并利用双荧光素酶活性分析检测分析miR-148a对CCKBR基因表达的调控和结合位点；Western Blot检测miR-148a过表达对CCKBR蛋白表达的作用。结果在人CCKBR 3’UTR上找到3个miR-148a的潜在结合位点；miR-148a真核表达载体构建成功，转染胃癌细胞后可显著过表达；miR-148a通过人CCKBR 3’UTR上423bp处的结合位点抑制CCKBR的基因表达；miR-148a过表达显著抑制胃癌细胞中CCKBR的蛋白表达。结论 CCKBR是胃癌相关miR-148a的靶基因，miR-148a通过其3’UTR上的结合位点抑制CCKBR的基因表达和蛋白合成，提示miR-148a可能通过调控CCKBR参与胃癌的发生发展。
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关键词
胃泌素受体胆囊收缩素B受体miR-148a胃癌microRNAGastrin receptorCholecystokinin B receptormiR-148aGastric cancermicroRNA
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1671.7856.2014.009.001
发布时间
2014-11-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家重点基础研究发展计划（973计划）（2012CB526600）
北京市科委项目（Z121100007512011）
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