获能培养液等因素对遗传工程小鼠冻融精子体外受精率的影响

Effects of preincubation medium and other factors affecting in vitro fertilization rate of post-thawed genetically engineering mouse spermatozoa

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摘要目的：探讨遗传工程小鼠精子冷冻、复苏及体外受精率的效果，建立简便、经济的遗传工程小鼠保种体系。方法采用精子冷冻、体外受精和胚胎移植技术，比较了精子获能培养液、雄鼠周龄及精子冻存液等因素对于遗传工程小鼠精子冷冻保存的影响。结果用CPA精子冻存液冷冻保存精子，精子复苏后用PM精子培养液获能培养，体外受精率在82．49％～91．43％，而HTF精子培养液的体外受精率为14．46％～27．38％，同品系间差异极显著（P＜0．01）；10～35周龄的雄鼠精子均能成功冷冻、受精，移植后产仔；使用R18S3，CPM，CPA三种不同精子冻存液冷冻遗传工程小鼠精子，复苏后采用 PM 精子培养液体外受精，受精率分别是75．85％、88．89％和94．27％，移植后得到阳性小鼠；体外受精后的胚胎成功冷冻保存，移植后产仔。结论采用CPA精子冻存液冷冻保存精子，精子复苏后用PM精子培养液体外受精，能够更有效地保存遗传工程小鼠。