换一批荧光定量 PCR 与半定量 PCR 检测猕猴不同器官组织中黄嘌呤脱氢酶／氧化酶基因的mRNA 表达差异的比较
Comparison between the quantitative and semi-quantitative fluorescence RT-PCR assays for the detection of XDH/XO mRNA expression in different organ tissues of rhesus monkey
摘要目的：比较荧光定量PCR 与半定量PCR 检测猕猴体内肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织，肾脏组织中黄嘌呤脱氢酶氧化酶（ XDH／XO）的mRNA的相对表达量的差异，为改进实验研究方法学提供参考依据。方法提取健康猕猴新鲜肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织，肾脏组织中总RNA，使用相同的引物序列及内参基因，分别用荧光定量PCR与半定量PCR进行相对定量检测，结果做比对分析。结果两种检测方法均能检测到健康猕猴新鲜肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织，肾脏组织中XDH／XO的mRNA表达，荧光定量PCR灵敏度可检测到肝脏组织0．4ng总RNA中的XDH／XO的mRNA表达，半定量PCR灵敏度可检测到肝脏组织15．625 ng总RNA中的XDH／XO的mRNA表达，荧光定量PCR较半定量灵敏度高39倍。两种方法检测结果均显示猕猴不同组织XDH／XO的mRNA表达在肝脏组织中表达水平最高，对于表达量较低的其他组织，荧光定量PCR与半定量PCR检测结果存在有一定差异。结论两种方法均可用于检测猕猴体内肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织，肾脏组织中黄嘌呤氧化脱氢酶（ XDH／XO）的mRNA的相对表达量，荧光实时定量PCR灵敏度较高于半定量PCR法。
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关键词
荧光定量PCR半定量PCR黄嘌呤脱氢酶氧化酶mRNA表达猕猴肝心肾睾丸皮肤Quantitative fluorescence RT-PCRSemi-quantitative RT-PCRXDH/XOExpression of mRNARhesus monkeyLiverSkinTestisHeartKidney
分类号
R-33（实验医学、医学实验）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1671-7856.2015.12.010
发布时间
2016-03-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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