A53T α-synuclein 抑制 SH-SY5Y 细胞2型囊泡单胺转运体的表达
A53T α-synuclein decreases the expression of type 2 vesicular monoamine transporter in neuroblastoma SH-SY5Y cells
摘要目的:研究稳定表达 A53T α-synuclein 对神经母细胞瘤 SH-SY5Y 细胞中2型囊泡单胺转运体(VMAT2)蛋白表达的影响。方法构建 A53Tα-synuclein 真核表达载体,用脂质体 lipofectamineTM 2000转染 SH-SY5Y 细胞,经 G418筛选获得稳定转染单克隆细胞株;分别采用 Western blotting 及 DCFH-DA 染色检测细胞系A53T α-synuclein 过表达对 VMAT2蛋白的表达及细胞内活性氧类物质(ROS)水平的影响。结果Western blotting结果显示 VMAT2的表达在稳定表达 A53T α-synuclein 的细胞系中明显降低。 DCFH-DA 染色结果显示稳定表达A53T α-synuclein 细胞系内 DCF signal (507.3±7.1)较对照组(410.7±10.5)明显增多(P <0.05)。结论A53Tα-synuclein 能够通过抑制 VMAT2的表达,增加细胞内的 ROS 水平,在帕金森病的发病过程中发挥重要作用。
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