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实验树鼩空肠弯曲菌、沙门氏菌和志贺菌多重荧光定量PCR方法的建立

Establishment of a multiplex real-time PCR method for quantitative detection of Campylobacter jejuni, Salmonella and Shigella in tree shrews

摘要目的 为实验树鼩微生物检测提供一种快速、简便、灵敏,并且特异性强的空肠弯曲菌、沙门氏菌和志贺菌多重荧光定量PCR检测方法.方法 根据空肠弯曲菌的HipO区域、沙门菌的inV区域和志贺菌的ipaH区域设计特异性引物和探针,并进行单病原定量PCR检测验证;后分析多重PCR的灵敏度和特异性,并使用该多重PCR方法检测实验树鼩样品.结果 本研究的PCR要素可用于空肠弯曲菌、沙门氏菌及志贺菌等单种菌的实时荧光定量PCR扩增.多重定量PCR扩增出了空肠弯曲菌、沙门氏菌和志贺氏菌标准扩增曲线;该方法的灵敏度为1×103 ng/μL;特异性检测未从其他参考菌株中检出阳性.结论 该多重定量PCR方法在实验树鼩微生物检测中具有很好的应用和推广前景.

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