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水貂阿留申病毒、肠炎病毒与犬瘟热病毒多重PCR检测方法的建立与应用

Establishment and application of a multiplex PCR assay for detection of Aleutian disease parvovirus, enteritis parvovirus and canine distemper virus in the mink

摘要目的 水貂阿留申病、病毒性肠炎与犬瘟热并称影响水貂健康的三大疫病,拟建立一种可同时检测三种病毒的多重PCR检测方法.方法 针对三种病毒基因保守区分别设计了3对特异性引物,对貂阿留申病毒(ADV)和水貂肠炎病毒(MEV)的DNA模板和犬瘟热病毒(CDV)的RNA模板进行了多重PCR扩增和扩增条件优化.结果 PCR可同时扩增出601 bp(ADV)、205 bp(MEV)和451 bp(CDV)的特异性目的条带,敏感性试验表明最低核酸检出量为ADV每微升2.67×104拷贝、MEV每微升3.02×104拷贝和CDV每微升1.72×105拷贝.临床样品检测结果表明多重PCR和单一PCR检测结果一致.结论 建立的多重PCR检测方法可快速地检测ADV、MEV和CDV单一或混合感染的临床样品.

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作者 马芹 [1] 王元智 [1] 闫文卓 [1] 赵丽丽 [1] 陈洪岩 [1] 陆涛峰 [1] 学术成果认领
作者单位 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,黑龙江省实验动物与比较医学重点实验室,哈尔滨 100193 [1]
分类号 R-33
栏目名称 技术方法
DOI 10.3969.j.issn.1671-7856.2017.12.017
发布时间 2018-01-05
基金项目
国家支撑计划项目
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