葛根素通过ERK1/2和p38 MAPK信号通路刺激成骨分化和骨形成的机制

Puerarin stimulates osteogenesis and bone formation through ERK1/2 and p38 MAPK signaling pathways

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摘要目的探究葛根素通过ERK1/2和p38 MAPK信号通路刺激成骨分化和骨形成的机制.方法分离培养成人成骨细胞(MC3T3-E1),运用MTT法对比加入不同浓度葛根素后细胞增殖能力和对生长曲线的影响.通过测定碱性磷酸酶活性检测葛根素对成骨细胞分化的影响.通过测定钙沉积量分析葛根素对骨形成的影响.通过ERKl/2阻断剂PD8089,p38抑制剂SB203580的加入分析ERK1/2和p38 MAPK信号通路刺激成骨分化和骨形成的机制.利用蛋白质免疫印迹(WB)检测细胞骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)的表达.结果不同浓度葛根素干预成骨细胞,可以不同程度上促进其增殖,1μmol/L葛根素组效果最明显.第1天和第3天较空白组增殖趋势不明显,第5天和第7天较空白组有明显差异.葛根素可以激活碱性磷酸酶活性,初级成骨细胞分化.葛根素可以促进钙的沉积,刺激骨形成.使用ERK1/2阻断剂PD8089后,或用抑制剂SB203580阻断p38 MAPK信号通路后,细胞增殖、碱性磷酸酶含量以及钙沉积量均较葛根素组有所下降.葛根素组(T group)BMP-2表达高于对照组(P<0.05);葛根素+PD8089组(T+PD group)低于T组高于对照组;葛根素+SB203580组(T+SB group)钙沉积量较T组明显降低(P<0.05),与对照组BMP-2表达量相比亦降低(P<0.05).结论葛根素在骨细胞周期过程中,ERK1/2和p38 MAPK信号通路对骨分化和骨形成起到了调控作用.