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    首页 > 中国比较医学杂志 > 稳定高表达人GPC3的SK-Hep-1细胞系的构建

    稳定高表达人GPC3的SK-Hep-1细胞系的构建

    The generation of a SK-Hep-1 cell line stably expressing human GPC3

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    摘要目的 获得稳定高表达人GPC3的SK-Hep-1细胞系.方法 构建人GPC3真核表达载体pcDNA3.1-GPC3,通过电穿孔的方法转染至SK-Hep-1细胞,利用G418进行细胞筛选,获得稳定高表达GPC3的细胞系.再利用Western blot和流式细胞术进行鉴定,分析稳定转染细胞表面GPC3蛋白的表达情况.结果 成功构建的真核表达质粒pcDNA3.1-GPC3,检测发现SK-Hep-1细胞G418最佳筛选浓度为700μg/mL,利用该浓度G418筛选转染SK-Hep-1细胞,获得了细胞表面能够稳定高表达人GPC3蛋白的SK-Hep-1细胞系.结论 建立高表达人GPC3蛋白的SK-Hep-1稳定细胞系,为研究靶向GPC3肝癌抗体提供了物质基础.

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    作者 何琦琳 [1] 郎巧利 [1] 余琳 [1] 黄楠 [1] 杨希 [1] 葛良鹏 [1] 学术成果认领
    作者单位 重庆市畜牧科学院,重庆市医用动物资源开发与利用工程技术研究中心,重庆 402460 [1]
    关键词 人GPC3SK-Hep-1稳定转染电穿孔法
    主题词 人(Persons)细胞系(Cell Line)转染(Transfection)电穿孔(Electroporation)细胞(Cells)
    分类号 R-33
    栏目名称
    研究报告
    DOI 10.3969/j.issn.1671-7856.2020.02.009
    发布时间 2020-04-01
    基金项目
    重庆市农发资金资助项目（17406）； 重庆市科研院所绩效激励引导专项（cqjxjl201709）； 国家自然科学基金（5167070727）
    • 浏览220
    • 被引3
    • 下载40
    中国比较医学杂志

    中国比较医学杂志

    2020年30卷2期

    59-63页

    ISTICPKUCA

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