熊果酸通过调节miR-373-3p对肺癌A549细胞凋亡和迁移的影响

Effects of ursolic acid on apoptosis and migration of A549 lung cancer cells by regulating miR-373-3p

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摘要目的探讨熊果酸通过调节miR-373-3p对肺癌A549细胞凋亡和迁移的影响.方法 MTT法检测熊果酸对肺癌A549细胞的毒性作用;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法、流式细胞术检测熊果酸作用于转染miR-373-3p的A549细胞后对A549细胞凋亡影响;实时荧光定量PCR法分别检测熊果酸加药组和转染miR-373-3p mimics组中A549细胞miR-373-3p表达程度;RT-PCR和免疫印迹法检测熊果酸作用下miR-373-3p调控的下游靶基因TXNIP mRNA及蛋白的表达;细胞划痕愈合实验检测miR-373-3p细胞迁移能力.结果熊果酸显著降低肺癌A549细胞的生长活力(P<0.05),IC 50为60μmol/L;瞬时转染miR-373-3p mimics可以上调A549细胞中miR-373-3p的表达(24 h,11.367±2.120;48 h,12.167±1.108);熊果酸作用于转染miR-373-3p mimics的A549细胞后,能够显著提高细胞中miR-373-3p mimics的表达水平(24 h,16.787±3.109;48 h,16.980±3.106);并且miR-373-3p mimics下游预测的目标基因TXNIP mRNA(10.757±0.79)及蛋白表达量(0.8210±0.043)均明显上升;FCM结果显示:miR-373-3p能够促进肺癌A549细胞凋亡(46.20±5.970).细胞转染miR-373-3p mimics后,迁移能力明显受到抑制(P<0.001).结论熊果酸能够通过促进肺癌A549细胞凋亡抑制其迁移,其作用机制可能是通过上调miR-373-3p表达来完成的.