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UBC9介导SUMO化修饰在同型半胱氨酸诱导巨噬细胞焦亡中的作用研究

Role of UBC9-mediated SUMO modification in homocysteine-induced pyroptosis of macrophages

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摘要目的探讨泛素结合酶9(ubiquitin conjugating enzyme 9,UBC9)介导SUMO化修饰在同型半胱氨酸诱导巨噬细胞焦亡中的作用.方法首先采用细胞计数试剂(cell counting kit-8,CCK-8)法和Western blot检测不同浓度(0 μmol/L、50μmol/L、100 μmol/L、150 μmol/L 和 200 μmol/L)同型半胱氨酸对小鼠巨噬细胞(RAW264.7)的活力及焦亡的影响;采用Western blot检测不同组细胞中UBC9、SUMO化修饰蛋白SUMO-1、炎症因子IL-1β的表达水平;qRT-PCR检测干扰前后UBC9的mRNA表达,同时检测干扰UBC9后,UBC9、焦亡相关蛋白、IL-1β及SUMO-1相关表达.结果当采用100 μmol/L的Hcy刺激后,巨噬细胞的活力影响最小且焦亡蛋白NLRP3、Caspase-1表达最明显(P＜0.001);与Control组相比,Hcy组IL-1β的表达水平升高(P＜0.01),SUMO-1表达升高(P＜0.01);与Control组相比,Hcy组中UBC9蛋白水平及mRNA水平表达均增高(P＜0.05);转染si-UBC9后,与si-NC+Hcy 组相比,si-UBC9+Hcy 组 NLRP3、Caspase-1、IL-1β、UBC9、SUMO-1 表达降低(P＜0.01).结论同型半胱氨酸诱导巨噬细胞焦亡的发生,其机制与上调泛素结合酶9发生SUMO化修饰有关.

作者马凌桔 ^[1] 迟宏扬 ^[2] 吴昕雪 ^[3] 马福军 ^[4] 田彦成 ^[4] 赵彩齐 ^[4] 何天宇 ^[5] 彭红建 ^[5] 姜怡邓 ^[5] 杨力 ^[6] 黄晖 ^[6] 马胜超 ^[2] 学术成果认领

作者单位宁夏医科大学总医院老年与特需医学科,银川 750004;国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室,银川 750004 ^[1] 国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室,银川 750004;宁夏医科大学检验学院,银川 750004 ^[2] 宁夏医科大学基础医学院,银川 750004 ^[3] 宁夏医科大学检验学院,银川 750004 ^[4] 国家卫生健康委员会代谢性心血管疾病研究重点实验室,银川 750004 ^[5] 宁夏医科大学总医院老年与特需医学科,银川 750004 ^[6]

关键词 UBC9 SUMO化巨噬细胞同型半胱氨酸细胞焦亡 UBC9 SUMO macrophage homocysteine pyroptosis

分类号 R-33（实验医学、医学实验）

栏目名称

研究报告

DOI 10.3969/j.issn.1671-7856.2024.06.002

发布时间 2024-08-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

国家自然科学基金（81900273）国家自然科学基金（82270492）宁夏青年科技拔尖人才培养项目宁夏自然科学基金优秀青年项目（2023AAC05035）