光照、咖啡因及联合法诱导建立斑马鱼失眠模型的比较研究

Comparative study of light,caffeine,and combined methods for inducing a zebrafish model of insomnia

二维码有效期 120s

摘要目的利用斑马鱼建立不同睡眠剥夺模型,为失眠的基础研究提供更多可重复性的实用建模参考方案.方法用持续光照(150 Lux)和光照加咖啡因两种干预手段诱导斑马鱼失眠模型,随机将斑马鱼分为空白组、光照组、咖啡因组(100 μmol/L)和联合组.利用旷场实验和昼夜节律行为学实验观察各组斑马鱼运动能力的区别;利用qPCR技术与ELISA技术检测相关睡眠基因与 5-HT神经递质的表达与分泌情况.结果与空白组相比,光照组斑马鱼睡眠时间、静息时间(白天)、睡眠回合明显减少(P＜0.01 或P=0.01),移动距离较空白组明显增加(P＜0.01).联合组与咖啡因组斑马鱼静息时间(白天)、睡眠回合较空白组增加(P＜0.01).联合组与咖啡因组斑马鱼活动距离无统计学意义(P＞0.05);与空白组相比,光照组中心区域游动距离百分比与中心区域游动时间百分比均降低(P＜0.05);与光照组相比,咖啡因组中心区域游动距离百分比与中心区域游动时间百分比均降低(P＜0.01);与空白组相比,6:00 与 12:00 光照组斑马鱼HTR1aa mRNA表达呈上调趋势(P＜0.05),光照组与联合组斑马鱼体内HTR1ab mRNA水平表达均无明显统计学意义(P＞0.05);与空白组相比,6:00 时光照组的5-HT分泌量均减少(P＜0.01);12:00 光照组与联合组 5-HT量均减少(P＜0.01);18:00 时光照组与联合组分泌量依然低于空白组(P＜0.01).结论单纯光照法最适用于斑马鱼幼鱼长效失眠模型的建立,其相关机制可能与HTR1aa基因以及 5-HT等生物因子有关.