换一批RSPO2对卵巢颗粒细胞氧化应激和凋亡的影响
Effects of RSPO2 on oxidative stress and apoptosis in ovarian granulosa cells
摘要目的 以人卵巢颗粒肿瘤细胞为模型,探究特异性顶部盘状底板反应蛋白2(RSPO2)对卵巢颗粒细胞氧化应激和凋亡的影响.方法 在COV434细胞中瞬时转染RSPO2过表达质粒和小干扰RNA(siRNA),实时荧光定量PCR(qPCR)、蛋白免疫印迹法(Western blot)检测过表达和干扰效率,利用活性氧检测试剂盒测定细胞内活性氧含量,流式细胞术检测凋亡水平,qPCR、Western blot测定氧化应激和凋亡相关基因表达量,免疫共沉淀检测互作蛋白.结果 成功实现RSPO2的过表达和干扰.过表达RSPO2显著抑制颗粒细胞内活性氧的水平(P＜0.05),极显著抑制颗粒细胞早期凋亡(P＜0.01),干扰RSPO2可得到相反的试验结果.过表达RSPO2能显著上调SOD1、SOD2、CAT mRNA和蛋白表达水平(P＜0.05),显著下调Caspase 3、Caspase 8表达水平(P＜0.05).相反,干扰RSPO2显著下调SOD1、CAT表达水平(P＜0.05),显著上调Caspase 3、Caspase 8表达水平(P＜0.05),并发现RSPO2和SOD 1、CAT、Caspase 3存在明显的蛋白互作现象.结论 干扰RSPO2促进细胞内活性氧的积累,下调SOD1和CAT的表达,从而促进氧化应激;干扰RSPO2上调Caspase 3和Caspase 8的表达,促进细胞的凋亡,提示RSPO2在卵巢颗粒细胞中发挥着重要的作用.
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分类号
R-33（实验医学、医学实验）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1671-7856.2024.12.007
发布时间
2025-03-03（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
广东省基础与应用基础研究基金（2024A1515012999）
广东省基础与应用基础研究基金（2023A1515010364）
广东省基础与应用基础研究基金（2022A1515012490）
国家生猪产业技术体系项目（CARS-35）
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