换一批
换一批摘要目的 为模式小鼠基因型批量鉴定工作建立高效的DNA提取方法.方法 以鼠尾组织为实验材料,采用碱煮简化法、碱煮常规法、蛋白酶K裂解法和DNA提取试剂盒 4 种方法提取模式小鼠DNA,测定DNA模板纯度、浓度,评价凝胶电泳图的优劣,并比较 4 种方法所耗时长及实验成本.结果 蛋白酶K裂解法提取的DNA浓度最高,碱煮简化法和常规法次之;试剂盒处理所得的DNA纯度较高,碱煮简化法次之.4 种方法处理所得的DNA模板通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增、凝胶电泳后均可得到清晰的DNA目的条带.此外,碱煮简化法提取的DNA模板在-20℃保存 1 个月后仍可用于基因鉴定,且耗时最少、成本最低.结论 模式小鼠批量鉴定基因型时,碱煮简化法是目前最简便、最快捷、最经济的DNA模板提取方法.
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