摘要目的 基于核转录因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)/溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶 4(glutathione peroxidase 4,GPX4)信号通路,通过体内外实验研究葛根芩连汤治疗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的作用机制 方法 以高脂饲料长期喂养大鼠24周完成NAFLD的诱导建模,成模大鼠随机分为正常组、模型组、葛根芩连汤高、中、低剂量组和二甲双胍组.自第25周起,按照分组情况灌胃相应药物两周直至取材.生化试剂盒检测各组大鼠肝组织氧化应激水平:丙二醛(malondialdehyde,MDA)和谷胱甘肽(glutathione,GSH).Fe2+试剂盒检测各组大鼠肝组织Fe2+含量 实时荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)法检测各组大鼠肝组织Nrf2、血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)、SLC7A11、谷胱甘肽合成酶(glutathione synthetase,GSS)、GPX4 和酰 基辅酶 A 合成化酶 4(acyl coenzyme A synthase,ACSL4)mRN A 的表达水平.采用 1 mmol/L 游离脂肪酸(FFA)诱导肝癌 HepG2 细胞产生脂质堆积模拟NAFLD构建体外模型,加入不同浓度葛根芩连汤和二甲双胍含药血清进行治疗.油红O染色检测各组细胞脂质堆积情况.试剂盒测定不同组HepG2细胞MDA和GSH含量.细胞专用Fe2+试剂盒检测各组细胞Fe2+含量 qRT-PCR法检测各组细胞中Nrf2、HO-1、SLC7A11、GSS、GPX4和ACSL4 mRNA的表现水平.结果 动物实验中,模型组大鼠肝组织MDA和Fe2+含量较正常组显著升高,GSH含量显著降低(P＜0.01);葛根芩连汤高、中剂量组和二甲双胍组可大幅度降低MDA和Fe2+含量,升高GSH含量,与模型组比较(P＜0.01,P＜0.05).与模型组相比,葛根芩连汤高、中剂量组和二甲双胍组均能增加Nrf2、HO-1、GSS、GPX4 mRNA的表达水平,降低ACSL4 mRNA的水平(P＜0.01,P＜0.05)在细胞实验中,HepG2细胞模型组红色脂滴较正常组明显增多,葛根芩连汤和二甲双胍的使用导致脂滴明显减少.试剂盒检测发现,较正常组而言,HepG2细胞模型组MDA和Fe2+含量明显上升,GSH含量显著降低(P＜0.01),而与模型组相比,葛根芩连汤各剂量组和二甲双胍组均可显著降低MDA和Fe2+含量(P＜0.01),葛根芩连汤高、中、低剂量组和二甲双胍组增加GSH含量(P＜0.01,P＜0.05).qRT-PCR实验表明,葛根芩连汤高剂量组中的Nrf2、GSS、GPX4和SLC7A11,中剂量组中的Nrf2、HO-1和SLC7A11,低剂量组中的HO-1、SLC7A11和GSS以及二甲双胍组中的GSS、Nrf2、HO-1、GPX4和SLC7A11 mRNA表达水平较模型组均显著增加(P＜0.01,P＜0.05).葛根芩连汤中、低剂量组和二甲双胍组ACSL4 mRNA表达量均显著降低(P＜0.01,P＜0.05).结论 葛根芩连汤可通过抑制铁死亡来改善非酒精性脂肪肝病,其作用机制可能与调节Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路有关.