摘要目的 探讨棕榈酸(PA)与黑碳(BC)联合暴露对小鼠精原细胞GC-1的影响和作用方式,以及NRF2 通路在PA与BC联合暴露损伤小鼠精原细胞GC-1中的作用.方法 设置对照组、PA组、BC组以及联合作用组(联用组),PA、BC作用于小鼠精原细胞GC-1 24 h,采用CCK-8法检测细胞存活率;实时逆转录定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测核因子红细胞 2 相关因子(Nfe2l2)、Kelch样ECH相关蛋白 1(Keap1)、过氧化氢酶(Cat)、血红素氧合酶-1(Hmox1)、醌氧化还原酶 1(Nqo1)、谷氨酰半胱氨酸连接酶(Gclc)、自噬相关基因(Lc3b、Sqstm1)、铁死亡相关基因谷胱甘肽过氧化物酶 4(Gpx4)mRNA表达水平;采用比色法测定细胞各组丙二醛(MDA)含量和还原型谷胱甘肽(GSH)含量.采用Western blot检测NRF2 蛋白表达.结果 随着浓度升高,PA、BC对精原细胞GC-1增殖的抑制作用增强,PA、BC作用于精原细胞GC-1 24 h的IC50 分别为 320 μmol/L和 560 μg/mL.PA组、BC组和联用组IC50 均低于单独作用组,两者联合具有协同作用.RT-qPCR结果显示,PA、BC暴露 24 h后,与对照组相比,PA组、BC组和联用组抗氧化应激相关基因Nfe2l2,Keap1,Cat,Hmox1,Nqo1,Gclc、铁死亡相关基因Gpx4、自噬相关基因(Lc3b、Sqstm1)的表达量均有显著性变化(P<0.05).各剂量组MDA含量显著升高(P<0.05),GSH含量显著降低(P<0.05).Western blot结果显示,与对照组相比,随着PA、BC浓度的增加(P<0.05),核心调控因子NRF2 的蛋白表达增加.结论 PA与BC均会抑制精原细胞GC-1的增殖,两者同时存在时具有协同作用,使细胞毒性作用增强.低水平高脂与BC联合作用于精原细胞GC-1时,NRF2 通路激活,引起氧化应激、铁死亡、自噬相关基因表达水平改变,致使机体出现氧化应激应答反应,提示NRF2 通路可能参与调节PA与BC联合暴露损伤精原细胞GC-1的过程.