超声微泡介导miR-545-3p调节E2F3信号通路对甲状腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响
Effects of ultrasound microbubble-mediated miR-545-3p on proliferation,migration,and invasion of thyroid cancer cells by regulating the E2F3 signaling pathway
摘要目的 探究超声微泡(UM)介导微小RNA-545-3p(miR-545-3p)调节E2F转录因子3(E2F3)信号通路对甲状腺癌(TC)细胞增殖、迁移、侵袭的影响.方法 用RT-qPCR法检测甲状腺乳头状癌(PTC)细胞系(TPC-1、K1、TTA1 细胞)和TC组织中miR-545-3p、E2F3 的mRNA水平.双荧光素酶实验检测miR-545-3p与E2F3 的关系.用超声技术制备微泡,将TPC-1细胞分为Control组、miR-NC组、miR-545-3p-mimics组、UM+miR-545-3p-mimics组、UM+miR-545-3p-mimics+pcDNA组、UM+miR-545-3p-mimics+E2F3 组;分别检测超声微泡介导的miR-545-3p靶向E2F3 对PTC细胞增殖、迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)的影响.免疫印迹检测相关蛋白表达.移植瘤实验检测miR-545-3p对肿瘤生长和E2F3 表达的影响.结果 TC组织及TPC-1 细胞中E2F3 mRNA表达水平升高,miR-545-3p表达水平降低(P<0.05).Starbase数据库在线预测发现,miR-545-3p与E2F3 间存在靶向结合位点.与miR-NC组相比,miR-545-3p-mimics组细胞克隆形成数、划痕愈合率、侵袭细胞数目减少,E2F3、CDK1、MMP-2、MMP-9、N-Cadherin、Vimentin 表达水平降低,miR-545-3p、E-Cadherin表达水平升高(P<0.05);与miR-545-3p-mimics组相比,UM+miR-545-3p-mimics组克隆形成数、划痕愈合率、侵袭细胞数目下降,E2F3、CDK1、MMP-2、MMP-9、N-Cadherin、Vimentin表达水平降低,miR-545-3p、E-Cadherin表达水平升高(P<0.05);与UM+miR-545-3p-mimics+pcDNA组相比,UM+miR-545-3p-mimics+E2F3组克隆形成数、划痕愈合率、侵袭细胞数目升高,E2F3、CDK1、MMP-2、MMP-9、N-Cadherin、Vimentin表达水平升高,E-Cadherin表达水平降低(P<0.05).miR-545-3p-mimics组肿瘤体积比miR-NC组小,质量比miR-NC组低,E2F3 表达水平比miR-NC组低,miR-545-3p水平比miR-NC组高(P<0.05);UM+miR-545-3p-mimics组肿瘤体积比miR-545-3p-mimics组小,质量比 miR-545-3p-mimics组低,E2F3 表达水平比 miR-545-3p-mimics组低,miR-545-3p表达水平比miR-545-3p-mimics组高(P<0.05).结论 UM介导miR-545-3p靶向调控E2F3信号通路抑制PTC细胞增殖、迁移、侵袭和EMT.
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