摘要目的 使用雷公藤多苷(TG)与环磷酰胺(CTX)构建早发性卵巢功能不全(POI)大鼠模型并进行机制初探,为POI实验研究和临床治疗提供理论依据.方法 体内实验筛选动情周期正常的SD大鼠,将其随机分为空白组、雷公藤多苷组和环磷酰胺组,记录动情周期,并于造模第15天(造模结束后第0天)和造模结束后第28天进行两批次取材,计算各级卵泡占比、考察激素水平等,并检测线粒体自噬相关蛋白磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、卷曲螺旋肌球蛋白样BCL2结合蛋白(Beclin1)、PTEN诱导激酶1(PINK1)、帕金蛋白(Parkin)、p62、微管相关蛋白1轻链3 Ⅱ型/Ⅰ型(LC3 Ⅱ/Ⅰ)表达.体外实验选用人卵巢颗粒细胞(KGN),CCK8检测TG和CTX对细胞增殖能力的影响,透射电镜观察线粒体超微结构和自噬小体,高内涵检测KGN细胞线粒体膜电位、活性氧(ROS)和线粒体超氧化物水平.结果 动物水平方面,与空白组相比,雷公藤多苷组和环磷酰胺组大鼠均出现体质量降低、精神萎靡、毛发枯疏、活动量减少以及摄食饮水减少等表现,动情周期紊乱,在造模结束后第28天,两组大鼠卵巢指数显著降低(P＜0.05).在造模结束后第0天,雷公藤多苷组闭锁卵泡占比升高(P＜0.05),而环磷酰胺组生长卵泡占比下降(P＜0.01)、闭锁卵泡占比升高(P＜0.01);在造模结束后第28天,仅环磷酰胺组出现生长卵泡占比下降(P＜0.01)、闭锁卵泡占比升高(P＜0.01).激素水平方面,在造模结束后第0天,雷公藤多苷组抗缪勒管激素(AMH)表达水平下降(P＜0.05),环磷酰胺组雌二醇(E2)和AMH表达水平下降(P＜0.05,P＜0.01)、促卵泡生成素(FSH)表达水平升高(P＜0.01);在造模结束后第28天,雷公藤多苷组E2表达水平下降(P＜0.05),而环磷酰胺组E2和AMH表达水平下降(P＜0.01)、FSH表达水平升高(P＜0.05).机制研究方面,在造模结束后第0天,雷公藤多苷组Beclin1和LC3 Ⅱ/Ⅰ蛋白表达升高(P＜0.05,P＜0.01)、p-mTOR/mTOR蛋白表达下降(P＜0.05),环磷酰胺组 Beclin1、PINK1 和 LC3 Ⅱ/Ⅰ 蛋白表达升高(P＜0.05,P＜0.01)、p-mTOR/mTOR蛋白表达下降(P＜0.01);在造模结束后第28天,雷公藤多苷组Beclin1、PINK1和Parkin蛋白表达升高(P＜0.05,P＜0.01)、p62蛋白表达下降(P＜0.05),环磷酰胺组Beclin1、PINK1、Parkin和LC3 Ⅱ/Ⅰ蛋白表达升高(P＜0.05,P＜0.01)、p-mTOR/mTOR和p62蛋白表达下降(P＜0.05).细胞水平方面,与空白组相比,雷公藤多苷组和环磷酰胺组细胞线粒体均受损,并出现大量自噬小体和自噬溶酶体,线粒体膜电位显著下降(P＜0.01),ROS和线粒体超氧化物显著上升(P＜0.01).结论 TG和CTX均能成功构建与临床相符的大鼠模型,其中CTX诱导的POI大鼠模型更优且更稳定.两种模型均表现出线粒体过度自噬,提示线粒体过度自噬可能是POI的致病机制之一.