换一批剑叶龙血素A间接竞争ELISA检测方法的建立
Development of Indirect Competitive ELISA for the Detection of Cochinchinenin A
摘要目的:建立间接竞争酶联免疫吸附分析法(ELISA)用于测定剑叶龙血素A(CA)含量.方法:合成半抗原剑叶龙血素A-4'-羧甲基醚(CA-4'-CME),再用碳二亚胺法将其与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清蛋白(OVA)分别偶联制备免疫原(CA-BSA)和包被原(CA-OVA),免疫小鼠制备多克隆抗体,建立间接竞争ELISA法并评估其分析性能.结果:通过紫外扫描分析CA-BSA和CA-OVA的偶联比分别为18∶1和24∶1.抗血清效价最高达到12000.用四参数logistic方程拟合CA标准曲线,在分析范围0 ～0.80 mg·L-1内,相关系数(R2)≥0.99,IC500.66 mg·L-1,最低检测限0.045 mg·L-1,批内CV≤12.5％,批间CV≤14.7％,回收率92.7％ ～ 118.7％,对5种CA类似物的交叉反应率＜5.38％.此方法检测龙血竭和龙血竭总黄酮中CA含量分别为1.27％,3.08％.结论:剑叶龙血素A间接竞争ELISA法精密度、准确度和特异性均较好,可方便地用于药物检测和分析.
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关键词
剑叶龙血素A人工抗原多克隆抗体酶联免疫吸附分析cochinchinenin Aartificial antigenpolyclonal antibodyenzyme-linked immunosorbent assay
分类号
R285.5（中药学）
栏目名称
DOI
10.11653/syfj2013200241
发布时间
2013-11-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（30973961）
中南民族大学学术团队项目（XTZ09010）
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