改良CTAB法提取新疆一枝蒿干叶基因组DNA
Extraction of Genomic DNA from Dry Leaves of Artemisia rupestris by Modified CTAB Methods
摘要目的:从自然干燥的新疆一枝蒿中提取高质量的基因组DNA,为该药材的分子生物学研究提供参考.方法:采用2种改良十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法与常规CTAB法提取新疆一枝蒿中基因组DNA,通过加适量聚乙烯吡咯烷酮(PVP)研磨样本,在核裂解前用细胞核裂解液(STE)洗涤多酚类和多糖类物质,利用95%乙醇室温沉淀DNA等措施.改良CTAB法2与1相比不用液氮研磨样本.通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度法和相关序列扩增多态性(SRAP)检测提取DNA的质量.结果:2种改良CTAB法所得DNA质量均优于常规CTAB法,DNA完整性较好,A260nm/A280nm在1.8 ~2.0,多糖类杂质去除较为干净.SRAP检验条带清晰、多态性良好.结论:2种改良CTAB法均适用于高质量新疆一枝蒿干叶基因组DNA的提取,得到的DNA纯度和完整性均较理想,可为后续分子生物学研究提供良好模版.
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