夜香树多糖诱导人骨肉瘤细胞MG-63凋亡作用的探讨
Experiment on Apoptosis of Human Osteosarcoma Cell Line MG-63 Induced by Polysaccharide Extracted from Cestrum nocturnum
摘要目的:探讨夜香树多糖对人骨肉瘤细胞MG-63凋亡诱导作用并研究其可能的作用机制.方法:从夜香树叶中提取夜香树多糖,分别用终质量浓度为2.5,5,10 mg·L-1的夜香树多糖处理处于对数生长期的MG-63细胞,另设MG-63细胞为空白组;不同质量浓度夜香树多糖作用72 h后,采用MTT法检测MG-63细胞增殖抑制作用;不同质量浓度夜香树多糖作用46 h后,采用透射电镜观察经处理过的细胞超微结构的改变,采用流式细胞术检测夜香树多糖对MG-63细胞凋亡率的影响,Western blot法分析半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3),Caspase-8,Caspase-9和B细胞淋巴瘤-白血病2(Bcl-2)的蛋白表达水平.结果:夜香树多糖显著抑制人骨肉瘤细胞MG-63增生,在5~10 mg·L-1质量浓度显著抑制细胞增殖,并呈浓度和时间的依赖性;电镜下可发现夜香树多糖能诱导细胞凋亡,胞质内出现大量空泡,细胞核染色质固缩,细胞表面绒毛减少;流式细胞仪检测表明,5 mg·L-1夜香树多糖可使MG-63细胞阻滞在G0/G1;夜香树多糖能剂量依赖诱导MG-63凋亡,浓度依赖性的降低MG-63细胞的Bcl-2蛋白表达和升高Caspase-8的蛋白表达(P<0.05,P<0.01).结论:夜香树多糖能抑制MG-63细胞增殖,诱导人骨肉瘤细胞MG-63凋亡,与作用剂量和作用时间呈正相关,这一过程可能与夜香树多糖下调Bcl-2和激活Caspase-8有关.
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