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扎里奴思方干预骨髓间充质干细胞移植对脑缺血再灌注损伤大鼠神经轴突再生的影响

Effect of Zhali Nusi Fang in Intervening Impact of Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells Transplantation on Neuronal Axons Regeneration in Rats After Cerebral Ischemia Reperfusion Injury

摘要目的:观察扎里奴思方(扎方)干预骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对大脑中动脉阻塞(MCAO)大鼠神经轴突再生的影响,并探讨其机制.方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、扎方组、移植组和联合组;线栓法制备大鼠MCAO模型,体外全骨髓贴壁筛选法培养及扩增BMSCs;大鼠灌胃给药(14.6 g·kg-1·d-1),BMSCs经颈内动脉移植入脑;移植后1,3,7,14 d取材,蛋白质免疫印迹(Western blot)检测生长相关蛋白(GAP-43),神经微丝蛋白(NF-200),髓磷脂相关糖蛋白(MAG)和勿动蛋白-A (Nogo-A)蛋白表达.结果:模型组GAP-43,MAG及Nogo-A蛋白表达较假手术组明显增高(P<0.01),NF-200降低(P<0.01);与模型组比较,扎方3,14 d组、移植3,7,14 d组及联合各组GAP-43表达增高(P <0.05,P<0.01),扎方、移植及联合各组NF-200表达增高(P<0.01),MAG及Nogo-A降低(P<0.01);与移植组比较,扎方14 d组GAP-43,7d组NF-200及1,3,14 d组MAG表达降低(P <0.05,P<0.01),3d组Nogo-A降低(P<0.01),7d组增高(P<0.05),联合各组GAP-43及1,14 d组NF-200表达增高(P<0.01),MAG,Nogo-A及7d组NF-200表达降低(P<0.01);扎方与联合组比较,联合3,7,14 d组GAP-43及14 d组NF-200表达增高(P<0.01),各组MAG及Nogo-A表达降低(P<0.01);同组间比较,模型7d组GAP-43及MAG表达增高(P <0.05,P<0.01),3d组NF-200表达较1d组增高(P<0.01),3d组Nogo-A达高峰(P<0.01),扎方、移植及联合各14 d组GAP-43表达较7d组增高(P<0.01),扎方及移植各7d组NF-200表达较3,14 d组增高(P<0.01,P<0.05),联合3d组NF-200表达较低(P<0.01),后逐渐增高(P<0.05),扎方、移植及联合各组MAG及Nogo-A表达呈先增后减趋势.结论:扎方可显著促进脑缺血再灌注损伤BMSCs移植后神经轴突再生,以二者联合作用显著,其机制可能与干预损伤后GAP-43,NF-200及MAG,Nogo-A的动态表达有关.

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