荔枝核总黄酮对结肠癌细胞株HT29的抑制作用及相关机制

Inhibitory Effect of Total Flavone of Litchi Semen on Colorectal Cancer Cell Lines HT29 and Expressions of NF-κB, TLR4, IL-1β and Its Mechanism

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摘要目的:探讨不同浓度的荔枝核总黄酮(total flavone of Litchi Semen,TFLS)对人的结直肠癌细胞株HT29的体外抑制作用及对该细胞系中核转录因子-κB(Nuclear factor-kappaB,NF-κB);Toll样受体4(Toll-like receptors,TLR4);白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)mRNA和蛋白表达的影响.方法:体外培养HT29细胞株,给予TFL(0,0.16,0.32,0.64,1.28,2.56 g·L-1)干预,给药后24,48,72 h,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法分别检测TFLS对HT29增殖的影响,采用逆转录PCR检测各组NF-κB,TLR4,IL-1β mRNA表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测NF-κB,TLR4,IL-1β蛋白表达情况.结果:MTT检测结果显示TFL对HT29增殖呈良好的时间依赖性和剂量依赖性,以作用72 h,质量浓度为2.56 g·L-1抑制率最高.与空白组比较,TFL组作用72 h后,HT29细胞系中NF-κB,IL-1β基因和蛋白表达水平均降低,尤以TFL 0.64,2.56 g·L-1组较明显(P＜0.05).TFL组TLR4基因表达较空白组差异明显(P＜0.05),蛋白表达差异不明显.结论:TFL在体外对HT29细胞系的增殖具有抑制作用,NF-κB可能为TFL抑制HT29细胞系增殖的关键因子.