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芫花对热敏通道瞬时感受器电位香草素受体1的影响

Effect of Genkwa Flos on Transient Receptor Potential Vanilloid 1 of Thermosensitive Channel

摘要目的:通过电生理全细胞膜片钳技术和动物行为学实验观察芫花对热敏通道瞬时变体电位香草素受体1(TRPV1)的影响,并探讨其机制.方法:以电生理全细胞膜片钳技术检测不同浓度中药芫花的75%乙醇提取物对瞬染人源TRPV1的HEK293细胞(hTRPV 1/HEK293细胞)诱导产生的跨膜电流,运用TRPV1特异性拮抗剂辣椒平,观察其是否可以抑制中药芫花诱导产生的跨膜电流;行为学检测使用雄性C57BL/6小鼠30只,将其分为空白组6只,芫花高剂量组6只,芫花中剂量组6只和芫花低剂量组6只,布洛芬组6只.芫花治疗组以低、中、高(0.195,0.39,0.78 g·kg-1·d-1)3个剂量进行灌胃,1h后,观察在(0±2)℃冷板和(55±1)℃热板中小鼠冷痛、热痛行为潜伏期的变化.结果:全细胞膜片钳实验显示在hTRPV 1/HEK293细胞上芫花75%乙醇提取物可以激活TRPV1通道产生明显的跨膜电流,该跨膜电流与TRPV1激动剂辣椒素诱发的电流在电流密度和电流-电压关系各方面均类似;量效实验显示,与细胞外液对比,10 g·L-1芫花醇提物能够激活hTRPV 1/HEK293细胞诱导其产生明显的跨膜电流(P<0.01).10 g·L-1芫花醇提物产生的跨膜电流>3 g·L-1(P <0.01).TRPV1特异性拮抗剂辣椒平可以完全抑制10 g·L-1芫花醇提物诱导产生的跨膜电流;小鼠冷热板实验中,芫花延长小鼠的冷痛和热痛行为潜伏期,与剂量呈现一定的量效关系.冷板实验中,与空白组小鼠比较,芫花中剂量组小鼠冷痛行为潜伏期延长(P<0.01),与空白组比较,芫花高剂量组冷痛时间也显著延长(P<0.01),布洛芬组小鼠冷痛行为潜伏期较空白组延长(P<0.o1).在热板实验中,与空白组比较,芫花高剂量组热痛行为潜伏期显著延长(P<0.01),布洛芬组的热痛行为潜伏期明显延长(P<0.05).结论:芫花的75%乙醇提物中含有TRPV1的激动剂,芫花所具备的温性、止痛和抗炎功效可能是热敏通道TRPV1活化后产生的系列效应.

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