摘要目的:探讨痛泻要方对慢性应激下肿瘤相关自然杀伤(NK)细胞功能的影响及其可能的分子机制.方法:将50只SPF级BABL/C雄性小鼠,随机分成正常组、模型组、痛泻要方低、中、高剂量组,每组10只.除空白组,其余各组进行慢性束缚应激干预7 d,进行强迫游泳及悬尾实验行为学检测来评价造模是否成功,成功后痛泻要方组分别给予痛泻要方低、中、高剂量(6.825、13.65、27.3g·kg-1)灌胃,其余组予生理盐水灌胃,14d后对每组小鼠进行结肠癌皮下瘤接种,构建慢性应激结肠癌小鼠模型.采用苏木素-伊红(HE)染色观察各组小鼠肿瘤组织病理形态变化;采用流式细胞术检测小鼠外周血及瘤体组织中CD49b阳性细胞的含量;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠外周血中NK细胞活化相关分子的含量;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测小鼠瘤体组织中主要组织相容性复合物Ⅰ类多肽相关序列A和B(MICA+MICB)、UL-16结合蛋白1(ULBP1)蛋白表达.结果:与正常组比较,模型组血清中5-羟色胺(5-HT)含量降低及皮质酮(CORT)含量升高(P＜0.05);与模型组比较,痛泻要方各组5-HT含量上升、CORT含量下降(P＜0.05,P＜0.01).与正常组比较,模型组瘤体体积、质量增大(P＜0.05);与模型组比较,痛泻要方各组瘤体体积降低,但差异无统计学意义.与正常组比较,模型组肿瘤细胞排列紧密、不规则,大小不均,异型性明显,多见核分裂,坏死面积较小,且肿瘤细胞及周围血管丰富.与模型组比较,痛泻要方各组肿瘤细胞排列稀疏,肿瘤组织内有不同程度的片状坏死区,坏死部分可见核碎裂、溶解和核碎屑.与正常组比较,模型组外周血及瘤体组织中CD49b阳性细胞数显著降低(P＜0.01);与模型组比较,痛泻要方中剂量组上升(P＜0.01);痛泻要方高剂量组明显上升(P＜0.05,P＜0.01).与正常组比较,模型组血清中颗粒酶-B(Gzms-B)、穿孔素(PF)、γ干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量均明显降低(P＜0.05,P＜0.01);与模型组比较,痛泻要方低剂量组PF、Gzms-B、TNF-α含量上升(P＜0.05,P＜0.01),痛泻要方中剂量组Gzms-B、PF、IFN-γ、TNF-α含量明显上升(P＜0.05,P＜0.01),痛泻要方高剂量组PF、IFN-γ、TNF-α含量显著上升(P＜0.01).与正常组比较,模型组中ULBP1蛋白表达量明显下降(P＜0.05);与模型组比较,痛泻要方低、中、高剂量组中ULBP1蛋白表达量明显上升(P＜0.05,P＜0.01),痛泻要方中、高剂量组MICA+MICB蛋白表达量明显上升(P＜0.05,P＜0.01).结论:痛泻要方可能通过上调NKG2DL中MICA+MICB及ULBP1表达促进NK细胞活化及功能发挥,阻延慢性应激下结肠癌进展.