右归丸调控BMP-2/Smad信号通路促进绝经后骨质疏松症大鼠骨形成
Mechanism of Youguiwan Regulating BMP-2/Smad Signaling Pathway to Promote Bone Formation in Postmenopausal Rats with Osteoporosis
摘要目的:观察右归丸对去卵巢骨质疏松大鼠的骨代谢及骨形态发生蛋白-2(BMP-2)/Smad信号通路的影响,研究右归丸防治骨质疏松症的作用机制.方法:采用双侧卵巢摘除法,制备绝经后骨质疏松症大鼠模型,将40只SD雌性大鼠随机分为5组,分别为假手术组、模型组、阿仑膦酸钠组(0.1 mg·kg-1)、右归丸高、低剂量组(5.36、2.68 g·kg1).造模7 d后给药,连续12周,每日1次.给药结束后,采用微计算机断层扫描技术(micro-CT)观察大鼠股骨组织结构变化,包括骨密度(BMD)、骨体积/总体积(BV/TV)、骨小梁数(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨表面/骨体积(BS/BV)和骨小梁分离度(Tb.Sp).番红-固绿染色观察成骨情况.酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中骨代谢标志物水平,包括骨碱性磷酸酶(BALP)、骨钙素(BGP)、I型前胶原氨基端原肽(PINP)和抗酒石酸酸性磷酸酶-5b(TRACP-5b).实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测大鼠股骨中Runt相关转录因子2(Runx2)、BMP-2和Smad1 mRNA及蛋白表达水平.结果:与假手术组比较,模型组大鼠骨小梁变稀疏,BMD、BV/TV、Tb.N及Tb.Th下降(P<0.05,P<0.01),BS/BV(P<0.05)及Tb.Sp上升;血清中BGP、BALP、PINP和TRACP-5b含量显著升高(P<0.01);大鼠股骨中Runx2、BMP-2和Smadl的mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,右归丸高剂量组与右归丸低剂量组骨小梁数目增加,骨微结构得到改善,BMD、BV/TV、Tb.N及Tb.Th均明显增加(P<0.05,P<0.01),BS/BV及Tb.Sp有上升趋势;骨代谢标志物含量下降(P<0.05,P<0.01),骨组织中Runx2、BMP-2和Smad1 mRNA和蛋白水平明显升高(P<0.05,P<0.01).结论:右归丸对绝经后骨质疏松症具有一定的防治作用,其作用机制可能与调控BMP-2/Smad信号通路促进骨形成有关.
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