补肾壮筋汤调控OPG/RANKL/RANK信号通路抗骨质疏松的作用
Role of Bushen Zhuangjin Decoction Against Osteoporosis by Regulating OPG/RANKL/RANK Signaling Pathway
摘要目的:观察补肾壮筋汤(BSZJ)对去卵巢大鼠骨代谢、骨密度(BMD)、骨小梁微结构及对骨保护素/核转录因子-κB受体活化因子配体/核转录因子-κB受体活化因子(OPG/RANKL/RANK)信号通路的影响.探索补肾壮筋汤抗骨质疏松作用机制.方法:32只雌性SD大鼠随机分为假手术组(SHAM)、卵巢去势模型组(OVX)、阿仑膦酸钠组(ALN,7.35 g·kg-1)和补肾壮筋汤组(BSZJ,3.2g·kg-1).卵巢切除12周后给予对应药物灌胃,共12周.12周后采集血清和骨标本.酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清 Ⅰ型前胶原氨基端原肽(PINP)和Ⅰ型胶原交联C-末端肽(CTX-Ⅰ),三点弯曲实验测试大鼠胫骨生物力学,微型计算机断层扫描(Micro-CT)分析腰椎BMD及骨小梁微结构.包括骨体积分数(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁分离度(Tb.Sp)及结构模型指数(SMI).苏木素-伊红(HE)及马松(Masson)染色分析腰椎骨小梁及骨胶原变化.实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)测定腰椎OPG、RANKL、RANK mRNA表达.蛋白免疫印迹法(Western blot)测定腰椎OPG、RANKL、RANK蛋白的表达.结果:与SHAM组比较,OVX组血清PINP及CTX-Ⅰ明显增加(P<0.05);与OVX组比较,ALN组及BSZJ组血清CTX-Ⅰ明显降低(P<0.05).与SHAM组比较,OVX组胫骨生物力学载荷(Fracture Load)明显降低(P<0.05);与OVX组比较,ALN组和BSZJ组生物力学载荷增加.与SHAM组比较,OVX组腰椎BMD、BV/TV、Tb.Th及 Tb.N 明显降低,Tb.Sp及 SMI明显增加(P<0.05);与 OVX组比较,BSZJ组腰椎 BMD、BV/TV及Tb.N 明显增加,Tb.Sp及SMI明显降低(P<0.05).与SHAM组比较,OVX组骨小梁结构紊乱,骨小梁之间的距离增加;胶原纤维变细,连续性欠佳;与OVX组比较,BSZJ组腰椎骨小梁结构相对完整,骨小梁之间的距离变小,胶原纤维增粗.与SHAM组比较,OVX组腰椎OPG mRNA及蛋白表达明显降低,RANKL、RANK mRNA及蛋白表达明显增加(P<0.05);与OVX组比较,BSZJ组OPG mRNA及蛋白表达明显增加,RANKL、RANK mRNA及蛋白表达明显降低(P<0.05).结论:补肾壮筋汤能够调节去卵巢大鼠骨代谢并发挥抗骨质疏松作用,潜在的作用机制是通过调控O PG/RANKL/RANK信号通路实现的.
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