摘要目的:探讨左归丸的抗乳腺癌诱导的破骨细胞活化及机制.方法:为了模拟乳腺癌诱导的破骨性骨转移,该实验采用含50％乳腺癌细胞MDA-MB-231培养上清的条件培养基培养RAW264.7细胞;实验中左归丸的给药浓度分别为5％、10％的左归丸含药血清.抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色检测破骨细胞活化情况;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测RAW264.7细胞Cathepsin K分泌;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测骨钙素(OCN)、唾液酸蛋白(BSP)mRNA表达水平;采用免疫共沉淀法检测Runt-相关转录因子2(Runx2)与核心结合因子β亚基(CBF-β)间相互作用;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Runx2、磷酸化(p)-Runx2、细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)、p-ERK1/2、p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、p-p38 MAPK及CBF-β等蛋白表达.结果:与空白组比较,MDA-MB-231细胞上清组TRAP阳性细胞数目、Cathepsin K分泌显著增加;p-Runx2蛋白表达、与CBF-β相互作用结合能力、BSP和OCN mRNA表达、p-p38 MAPK和p-ERK1/2蛋白表达显著降低(P＜0.01).与MDA-MB-231细胞上清组比较,左归丸含药血清可显著减少TRAP阳性细胞数目、Cathepsin K分泌(P＜0.01),显著增加p-Runx2蛋白表达、BSP和OCN mRNA表达、p-p38 MAPK和p-ERK1/2蛋白表达,并促进Runx2与CBF-β相互作用(P＜0.01),Runx2表达则未见明显改变.与空白组比较,BVD-523组p-p38 MAPK和p-ERK 1/2蛋白表达显著降低(P＜0.01);与BVD-523组比较,低、高浓度左归丸含药血清组p-p38 MAPK表达显著升高(P＜0.01),高浓度左归丸含药血清组p-ERK1/2表达也显著升高(P＜0.01),低剂量组差异无统计学意义.结论:左归丸可以通过诱导破骨细胞内骨形成的关键性转录调节蛋白Runx2磷酸化而抑制破骨细胞活化,这一过程与p38 MAPK/ERK信号转导途径的活化密切相关.