摘要目的:非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是一种代谢应激性肝损伤,铁死亡参与了 NAFLD的发生发展,通过探究五味子乙素治疗NAFLD的疗效及作用机制,可为NAFLD的防治寻求有效方案.方法:通过检索有机小分子生物活性数据(PubChem)平台获取五味子乙素的分子结构,经小分子药物靶点预测在线平台(SwissTargetPrediction)预测相关靶点,并通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、高通量中药实验参考数据库(HERB)数据库进行补充,对活性成分的靶点进行预测;采用基因数据库(GeneCards)、铁死亡数据库(FerrDb)分别获取NAFLD疾病、铁死亡靶点;然后经交集映射筛选出核心靶点,并构建靶点间蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)分析图,采用生物学信息注释数据库(DAVID)对核心靶点进行基因本体(GO)功能富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析;最后将五味子乙素-核心靶点分子对接并计算结合能.使用蛋氨酸胆碱缺乏(MCD)饲养C57BL/6小鼠建立NAFLD模型,随机分为正常组、模型组、阳性药(易善复)组、五味子乙素低剂量组、五味子乙素高剂量组,检测给药后小鼠的体质量、肝脏指数;生化试剂盒检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)及肝组织匀浆中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、亚铁离子(Fe2+)水平,苏木素-伊红(HE)及红油O染色观察肝组织病理改变,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清细胞因子肿瘤坏死因子(TNF)-α,白细胞介素(IL)-1β、IL-6及4-羟基壬烯醛(4-HNE)水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)、实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肝组织中铁死亡溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、溶质载体家族3成员2(SLC3A2)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、转铁蛋白(Transferrin)、重链铁蛋白(FTH)相关蛋白及mRNA表达.结果:中药单体五味子乙素,共筛选得到五味子乙素作用2 370个靶点、NAFLD疾病靶点2 547个、铁死亡靶点1 451个,五味子乙素-NAFLD-铁死亡共同靶点90个;获取GO富集505个,KEGG通路富集92条;分子对接提示五味子乙素与铁死亡关键靶点SLC7A11、SLC3A2具有良好结合力.动物实验发现,五味子乙素干预NAFLD小鼠可显著降低小鼠肝脏指数,降低ALT、AST、TC、TG、IL-6、IL-1β、TNF-α水平,改善模型小鼠肝细胞气球样变及炎细胞浸润,小鼠肝脏的脂质蓄积;此外,五味子乙素亦可显著降低MDA、4-HNE、Fe2+水平,升高GSH;五味子乙素可显著升高肝组织SLC7A11、SLC3A2、GPX4蛋白及mRNA水平,降低Transferrin蛋白及mRNA水平.结论:五味子乙素可通过抑制肝细胞铁死亡缓解NAFLD.