摘要目的:探讨身痛逐瘀汤对大鼠椎间盘退变(IDD)的影响及其保护作用机制.方法:体外研究:40只雄性大鼠分别灌胃给予生理盐水、身痛逐瘀汤低、中、高剂量(3.38、6.75、13.5 g·kg-1),连续给药7 d后收集血清.另取10只雄性大鼠,分离髓核细胞.以白细胞介素-1β(IL-1β)处理来构建IDD细胞模型,分别加入身痛逐瘀汤含药血清和铁死亡抑制剂(Fer-1),探究身痛逐瘀汤含药血清对髓核细胞增殖及铁死亡的影响.为研究沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子E2相关因子2(Nrf2)在身痛逐瘀汤含药血清调控髓核细胞铁死亡中的作用,在IL-1β和身痛逐瘀汤高剂量含药血清处理的同时,分别加入SIRT1抑制剂Ex 527和Nrf2抑制剂ML385干预.细胞增殖与活性检测法(CCK-8)检测细胞活力,EdU染色检测细胞增殖,比色法检测Fe2+、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、长链脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)、Ⅱ型胶原(Collagen Ⅱ)、蛋白聚糖(Aggrecan)、SIRT1、Nrf2蛋白表达,免疫荧光检测SIRT1蛋白表达.体内研究:以雄性大鼠为研究对象,采用纤维环穿刺法构建IDD大鼠模型,随机分为假手术组、模型组、身痛逐瘀汤组(13.5 g·kg-1)及阳性药组(尼美舒利分散片,0.18 mg·kg-1),给药体积为1 mL·kg-1.假手术组和模型组则灌胃等体积的生理盐水.给药1次/d,连续28d.末次给药结束后采用苏木素-伊红(HE)染色法结合Masuda评分法,观察大鼠椎间盘组织病理变化并进行病理学评分.Western blot检测髓核组织中SIRT1、Nrf2、GPX4和Collagen Ⅱ蛋白表达.结果:与空白组比较,IL-1β组髓核细胞中Fe2+和MDA含量及ACSL4蛋白水平明显升高(P＜0.05),而细胞存活率、GSH浓度和GPX4、Collagen Ⅱ、Aggrecan蛋白表达均明显降低(P＜0.05).与空白组比较,身痛逐瘀汤含药血清和Fer-1干预逆转了 IL-1β对髓核细胞活力和铁死亡的影响,髓核细胞中的Collagen Ⅱ和Aggrecan蛋白水平明显升高(P＜0.05).此外,IL-1β组髓核细胞中Sirt1和Nrf2蛋白表达降低(P＜0.05).与IL-1β组比较,身痛逐瘀汤高剂量含药血清+IL-1β组髓核细胞中SIRT1和Nrf2蛋白表达均明显增加(P＜0.05).与身痛逐瘀汤高剂量含药血清+IL-1β组比较,ML385组细胞中Nrf2和GPX4蛋白水平及GSH浓度明显降低,Fe2+含量和MDA水平均明显增加(P＜0.05).此外,Ex 527组细胞中的SIRT1、Nrf2和GPX4蛋白水平均降低,较身痛逐瘀汤高剂量含药血清+IL-1β组差异有统计学意义(P＜0.05).体内研究结果表明,与假手术组比较,模型组大鼠的椎间盘组织严重退变,病理学评分和ACSL4蛋白水平明显增加(P＜0.05),而SIRT1、Nrf2、GPX4和Collagen Ⅱ蛋白水平则明显降低(P＜0.05).与模型组比较,身痛逐瘀汤组大鼠椎间盘退变得到明显改善,病理学评分和ACSL4蛋白水平明显降低(P＜0.05),SIRT1、Nrf2、GPX4和Collagen Ⅱ蛋白水平明显升高(P＜0.05).结论:身痛逐瘀汤可能激活SIRT1/Nrf2信号通路,抑制IDD大鼠髓核细胞铁死亡,从而延缓IDD进程.