摘要目的:探讨加味少腹逐瘀汤通过小鼠双体4/肿瘤抑制因子p53/谷胱甘肽过氧化物酶4(MDM4/p53/GPX4)信号通路诱导子宫内膜异位症大鼠异位子宫内膜组织铁死亡的作用机制.方法:将70只SPF级雌性SD大鼠随机分为空白组(n=10)、假手术组(n=10)和造模组(n=50),假手术组大鼠行剖腹探查术,造模组大鼠按照自体移植法构建子宫内膜异位症疾病模型.造模成功后随机分为模型组,孕三烯酮组(0.25 mg·kg-1),加味少腹逐瘀汤高、中、低剂量组(30、15、7.5g·kg-1),每组10只.给药4周后,处死大鼠取材.透射电镜观察大鼠子宫内膜组织超微结构改变,普鲁士蓝染色观察子宫内膜组织铁离子沉积,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组大鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,比色法检测大鼠子宫内膜组织铁离子(Fe2+)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量,免疫荧光法(IF)检测子宫内膜组织GSH、GPX4相对荧光强度,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测子宫内膜组织中磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化(p)-PI3K、蛋白激酶B(Akt)、p-Akt、MDM4、p53、GPX4蛋白相对表达量,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测PI3K、Akt、MDM4、p53、GPX4 mRNA表达.结果:与空白组及假手术组比较,模型组大鼠超微结构可见铁死亡损伤减轻,普鲁士蓝染色可见铁离子聚集数量减少,铁离子阳性表达面积下降,血清IL-6、IL-1β、TNF-α含量升高,子宫内膜组织Fe2+、MDA相对含量降低,GSH相对含量升高,GSH、GPX4荧光相对强度增强(P＜0.01),PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、MDM4、GPX4蛋白及mRNA表达量上升,p53蛋白及mRNA表达量下降(P＜0.01).与模型组比较,孕三烯酮组及加味少腹逐瘀汤高、中剂量组异位子宫内膜组织,透射电镜超微结构可见铁死亡损伤不同程度加重,普鲁士蓝染色可见铁离子聚集数量增加,铁离子阳性表达面积上升,血清IL-6、IL-1β、TNF-α含量下降,子宫内膜组织Fe2+、MDA相对含量升高,GSH相对含量下降,GSH、GPX4荧光相对强度减弱,PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、MDM4、GPX4蛋白及mRNA表达量下降,p53蛋白及mRNA表达量上升(P＜0.05,P＜0.01).结论:加味少腹逐瘀汤可能通过干预MDM4/p53/GPX4信号通路关键蛋白,诱导异位子宫内膜组织铁死亡,减轻炎性反应,从而对子宫内膜异位症起到治疗作用.