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洗心汤含药血清对Aβ25-35诱导的BV-2小胶质细胞极化的调控作用

Xixintang-medicated Serum Regulates Aβ25-35-induced Polarization of BV-2 Microglial Cells

摘要目的:通过体外研究,探索洗心汤(XXT)含药血清对β淀粉样蛋白(Aβ)25-35诱导的BV-2小胶质细胞极化的影响,以揭示该方在防治阿尔茨海默病中的潜在机制,为临床治疗提供科学依据.方法:将BV-2小胶质细胞传代培养后,使用细胞增殖和活性检测(CCK-8)法筛选出最适浓度的XXT含药血清和Aβ25-35.实验设置空白组、模型组(浓度为40 μmol·L-1的Aβ25-35)、XXT含药血清组(浓度为40 μmol·L-1的Aβ25-35+10%XXT含药血清)和空白血清组(浓度为40 μmol·L-1 的 Aβ25-35+10%空白血清处理组).各组细胞孵育24 h后,采用免疫荧光法检测离子化钙结合适配分子1(IBA1)、CD16/32及CD206的表达;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测CD206、CD163、诱导型一氧化氮合成(iNOS)、精氨酸酶-1(Arg-1)mRNA表达水平;通过酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测NGF、iNOS、Arg-1的含量.采用硝酸还原酶法测定NO含量.结果:与空白组比较,模型组IBA1、CD 16/32表达显著升高(P<0.01),CD206的表达明显降低(P<0.05),iNOS mRNA表达水平显著上调(P<0.01),含量明显增高(P<0.05),CD206、CD163、Arg-1的mRNA表达水平明显下调(P<0.05,P<0.01),Arg-1、NGF含量明显降低(P<0.05),NO含量明显升高(P<0.05).与模型组比较,XXT含药血清组IBA1,CD16/32表达明显降低(P<0.05,P<0.01),CD206的表达显著升高(P<0.01);iNOS含量和mRNA表达水平明显下调(P<0.05,P<0.01),同时CD206、CD163、Arg-1的mRNA表达水平显著上调(P<0.01),Arg-1、NGF含量明显升高(P<0.05),NO含量明显降低(P<0.05).与模型组比较,空白血清组各指标差异无统计学意义.结论:XXT含药血清可通过抑制M1型小胶质细胞极化并促进M2型极化,发挥抗炎和神经营养作用.

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