升陷汤对慢性心力衰竭大鼠心肌微血管损伤的保护作用
Protective Effect of Shengxiantang on Myocardial Microvascular Injury in Rats with Chronic Heart Failure
摘要目的:探讨升陷汤对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心功能及心肌微血管损伤的保护作用.方法:采用主动脉弓缩窄术(TAC)制备CHF大鼠模型,72只SD大鼠随机选取8只为假手术组,只开胸不结扎主动脉弓,将造模成功的40只大鼠随机分为模型组,升陷汤低、中、高剂量组(5.1、10.2、20.4g·kg-1),盐酸曲美他嗪组(6.3 mg·kg-1),每组各8只.造模后4周开始给药,给药组分别予相应药物灌胃,假手术组和模型组予等量蒸馏水,连续给药8周.超声心动图检测大鼠心功能;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测一氧化氮(NO)、内皮素(ET-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、血管性血友病因子(vWF)水平;透射电镜观察微血管超微结构变化;免疫组化法检测心肌组织ATP合成酶亚基(ATP5D)、F-肌动蛋白(F-actin)蛋白表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测心肌组织闭合蛋白(Occludin)、密封蛋白(Claudin)、血管内皮钙黏蛋白(VE-Cadherin)、闭锁小带蛋白1(ZO-1)蛋白表达水平;免疫荧光染色测定微血管密度.结果:与假手术组比较,模型组大鼠射血分数(EF)、左心室缩短分数(FS)显著降低(P<0.01),左室舒张内径(LVIDd)、左室收缩内径(LVIDs)、左室舒张末期后壁厚度(LVPWd)、左室收缩末期后壁厚度(LVPWs)、左室舒张末期容积(LVVOLd)、左室收缩末期容积(LVVOLs)显著升高(P<0.01),NO、VEGF水平显著降低(P<0.01),ET-1、vWF水平显著升高(P<0.01),电镜下微血管基底膜不完整,紧密连接模糊,ATP5D、F-actin蛋白及Occludin、Claudin、ZO-1、VE-Cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01),微血管相对密度显著降低(P<0.01).经升陷汤干预后,CHF 大鼠 EF、FS 显著升高(P<0.01),LVIDd、LVIDs、LVPWd、LVPWs、LVVOLd、LVVOLs 显著下降(P<0.01),NO、VEGF 水平显著升高(P<0.01),ET-1、vWF水平显著下降(P<0.01),电镜下微血管基底膜相对完整,紧密连接相对连续,ATP5D、F-actin及Occludin、Claudin、ZO-1、VE-Cadherin表达水平明显上升(P<0.05,P<0.01),微血管相对密度显著升高(P<0.01).结论:升陷汤能有效改善CHF大鼠心功能,减轻微血管内皮损伤,加强内皮细胞间连接,提高微血管密度,从而保护心肌微血管损伤.
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