色空间法结合化学计量学判别当归炭的炮制程度
Color Space Method Combined with Chemometrics to Determine Processing Degree of Angelicae Sinensis Radix Carbonisata
摘要目的:以色空间法结合统计学分析探究当归炭炮制过程中外观颜色及理化性质的变化规律,为当归炭炮制终点确定和饮片质量评价提供参考.方法:以炮制时间(4、8、12、16min)和炮制温度(180、200、220、240 ℃)为影响因素,采用完全随机实验设计制备不同炮制程度的当归炭饮片;采用分光测色仪测定当归炭明暗度值(L*)、红绿色度值(a*)、黄蓝色度值(b*)和总色度值(E*ab),并计算色差值(ΔE),通过判别分析法对当归炭色度值数据进行分析;采用pH计、紫外-可见分光光度法和超高效液相色谱法分别测定不同炮制程度当归炭的pH、炭素吸附力,以及鞣质、5-羟甲基糠醛(5-HMF)、色氨酸、绿原酸、阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、藁本内酯的含量.利用主成分分析(PCA)对各理化指标数据进行分析,确定当归炭炮制工艺后,建立区分不同炮制程度当归炭饮片的典则判别函数并进行留一法交叉验证;Pearson相关性分析探究各理化指标成分与色度值之间的关联.结果:随着炮制时间延长,L*、a*、b*、E*ab均呈下降趋势,建立的基于颜色参数的判别模型能对不同炮制程度的当归炭进行区分.随炮制时间延长,pH呈上升趋势,炭素吸附力、鞣质、5-HMF、色氨酸的含量均呈现先增后降的趋势,其中炭素吸附力和鞣质、5-HMF含量在炮制8~12min时相继达到最大值;绿原酸、阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、藁本内酯的含量均呈下降趋势,在炮制至8 min时下降60%~80%,最佳炮制时间应为8~12 min.PCA可明显区分不同炮制时间的当归炭,而温度对炮制程度无明显影响.12批工艺验证结果(10 min,180~240 ℃)显示,除3个批次被判别为Ⅱ类轻炭外,其余批次均判别为Ⅲ类标准炭,且各批次当归炭色度值指标均在Ⅱ~Ⅲ类当归炭色度值参考值范围内.相关性分析结果显示,各色度值与pH、炭素吸附力均呈负相关,与色氨酸、绿原酸、阿魏酸、洋川芎内酯I、洋川芎内酯H、藁本内酯含量均呈正相关;pH和炭素吸附力与上述成分含量均呈负相关;炭素吸附力与5-HMF含量呈正相关.结论:当归炭的色度值和各理化指标成分含量随炮制时间延长发生明显改变,且色度值和各理化成分指标之间普遍存在相关性,结合色泽及理化指标变化情况确定当归炭的最佳炮制时间应为8~12 min.该研究揭示了当归炭炮制过程的相关指标动态变化规律,可为当归炭炮制程度判别及炮制终点量化研究提供参考.
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