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安寐丹调控cGAS/STING信号通路介导免疫炎症改善失眠大鼠学习记忆机制

Mechanism of Anmeidan in Improving Learning and Memory in Insomnia Model Rats by Mediating Immunoinflammation via cGAS/STING Signaling Pathway

摘要目的:探讨安寐丹通过调节环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cGAS)/干扰素基因刺激蛋白(STING)信号通路影响免疫炎症,进而改善失眠大鼠学习记忆功能的机制.方法:60只SD大鼠随机分为空白组,模型组,苏沃雷生组(30 mg·kg-1),安寐丹低、中、高剂量组(4.55、9.09、18.18 g·kg-1),每组10只;腹腔注射对氯苯丙氨酸(PCPA)构建失眠大鼠模型,给予对应剂量的安寐丹水煎液与生理盐水灌胃28 d;Morris水迷宫、新物体识别检测学习记忆功能;苏木素-伊红(HE)染色和尼氏(Nissl)染色观察海马细胞形态;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清白细胞介素-1(IL-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-12(IL-12)、白细胞介素-18(IL-18)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;蛋白免疫印迹法(Western blot)与实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测海马cGAS、STING蛋白和mRNA相对表达量.结果:与空白组比较,模型组5-羟色胺(5-HT)含量显著降低(P<0.01);上平台潜伏期和总路程明显延长(P<0.05,P<0.01),目标象限驻留时间、穿越平台次数显著减少(P<0.01),新物体相对识别指数显著降低(P<0.01);海马神经元形态、排列松散紊乱,胞内尼氏体数量减少;IL-1、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-12、IL-18、TNF-α 和 cGAS、STING 通路蛋白及 mRNA 相对表达量显著上调(P<0.01).与模型组比较,安寐丹高剂量组上平台潜伏期明显缩短(P<0.05),安寐丹中、高剂量组和苏沃雷生组目标象限驻留时间、穿越平台次数显著增加(P<0.01),各给药组总路程显著缩短(P<0.01),新物体相对识别指数显著上升(P<0.01),海马神经元排列稍紧密整齐,胞内尼氏体数量增加;安寐丹中、高剂量组IL-1、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-12、IL-18、TNF-α和cGAS蛋白及mRNA表达明显下调(P<0.05,P<0.01).结论:安寐丹改善失眠大鼠学习记忆可能与cGAS/STING信号通路抑制免疫炎症相关.

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