摘要目的:探讨参芪地黄汤对糖尿病肾病(DKD)的治疗作用及其机制,重点考察其对花生四烯酸相关性铁死亡的影响.方法:将60只C57BL/6小鼠分为正常组10只,造模组50只,其中43只造模成功.将造模成功小鼠分为模型组,参芪地黄汤低、中、高剂量组,达格列净组,达格列净组予以达格列净药液(0.13mg·kg-1)灌胃,参芪地黄汤组分别予以参芪地黄汤水溶液(4.68、9.36、18.72 g·kg-1)灌胃,正常组与模型组分别予以等容生理盐水灌胃.电子天平和血糖仪分别监测小鼠体质量和小鼠尾尖空腹血糖变化;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测小鼠血清肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)水平;苏木素-伊红(HE)染色、马松染色(Masson)、过碘酸雪夫(PAS)染色检测肾组织病理变化;倒置荧光显微镜观察冰冻切片中活性氧(ROS)的荧光强度,以评估肾脏组织中的亚铁离子(Fe2+)及脂质过氧化水平;对小鼠肾组织谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)免疫荧光染色,以检测其定位定量表达;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测铁死亡关键蛋白如GPX4、胱氨酸谷氨酸反向转运蛋白(xCT)和花生四烯酸代谢通路相关蛋白如ACSL4、溶血磷脂酰胆碱酰基转移酶3(LPCAT3)、花生四烯酸-15-脂氧合酶(ALOX15)的表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠肾组织中铁死亡关键蛋白如溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、GPX4及花生四烯酸代谢通路相关mRNA的表达.结果:与正常组比较,DKD模型组小鼠体质量显著下降(P＜0.01),血糖水平显著升高(P＜0.01),24h尿蛋白、血清Scr和BUN水平均显著升高(P＜0.01),肾小球系膜细胞增生、基膜增厚、肾小管萎缩和肾小管间质炎症细胞浸润等严重的病理损伤,肾组织中Fe2+、丙二醛(MDA)、脂质过氧化物(LPO)及 ROS 水平显著升高(P＜0.01),GPX4、xCT 显著降低(P＜0.01),ACSL4、LPCAT3、ALOX15 显著升高(P＜0.01),GPX4、SLC7A11 mRNA 均显著降低(P＜0.01),ACSL4、LPCAT3、ALOX 15 mRNA 显著升高(P＜0.01).与模型组比较,参芪地黄汤低、中、高剂量组和达格列净组小鼠体质量显著升高(P＜0.01),血糖水平显著下降(P＜0.01),24h尿蛋白、血清Scr水平均显著降低(P＜0.01),肾小球和肾小管病变均有不同程度减少,肾小球和肾小管纤维化程度均有不同程度降低,参芪地黄汤高剂量组和达格列净组小鼠Fe2+、MDA、LPO、ROS水平均显著降低(P＜0.01),参芪地黄汤中、高剂量组和达格列净组小鼠肾组织中GPX4、xCT显著增加(P＜0.01),ACSL4、LPCAT3、ALOX15 明显下降(P＜0.05,P＜0.01),ACSL4、LPCAT3、ALOX15 mRNA显著下降(P＜0.01).结论:参芪地黄汤能够通过抑制铁死亡来改善DKD,其机制可能与降低铁离子水平、抑制脂质过氧化、上调GPX4表达及下调ACSL4表达有关.该研究为中医药治疗DKD提供了新的思路和理论依据,并为开发新型DKD治疗药物提供了潜在靶点.